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实验室净化工程

PCR实验室建设安装方案

来源:海博尔净化   编辑:海博尔企划部    发布时间:2021-09-03   点击:

 

        实验室分为四个单独的工作区域:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区;为避免交叉污染,进入各个工作区域毕须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区;各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行;PCR实验室为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式,同时要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

        试剂贮存和准备区:该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备,试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域;试剂原材料须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。

        标本制备区:该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸<RNA、DNA提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成;本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染;由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。

        扩增反应混合物配制和扩增区:该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增,已制备的DNA模板和合成的cDNA的加入和主反应混合液制备成反应混合液等也可在本区内进行;相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出;为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动,个别操作如加样等应在超净台内进行。

        扩增产物分析区: 该区域主要进行的操作为扩增片段的测定,如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设;本区是罪主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

        各个实验区域须设置合理,各个实验区域要有明显的标记,如醒目的门牌或不同的地面颜色等,以避免各个不同实验区域设备物品、试剂等发生混淆;合理的空调通风系统设置,尽量采用全送全排的空调系统;严格的气流压力控制,保证不同的实验区内不同的压力要求;在实验操作过程中,操作者毕须戴手套,并经常更换,此外操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施;实验工作结束后,须立即对本区进行清洁,除常规的消毒液体对表面进行擦拭消毒或紫外线灯的照射消毒外,对一些实验设备还应进行高压消毒处理;严格控制进出实验室的人员,与实验无关的人员不得随意进出实验室,有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门;在各个实验区域使用带有明显区别标志的工作服如不同颜色,当工作人员离开时不得将本区的工作服带至其它区域;尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性;扩增产物分析区是罪主要的扩增产物污染来源,废液不能在实验室中倾倒,须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉,用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理。

 

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